實驗目的:本次實驗需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度,故選用冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)對樣品進行低溫濃縮,在保護樣品的同時使用戶獲得優(yōu)質(zhì)效果。
樣品介紹:
蛋白質(zhì)是包括人類在內(nèi)的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎之一。隨著分子生物學、結構生物學、基因組學等研究的不斷深入,人們意識到僅僅依靠基因組的序列分析來試圖闡明生命活動的現(xiàn)象和本質(zhì)是遠遠不夠的。許多學者將生命科學領域的研究焦點從基因轉向蛋白質(zhì)。
研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎和關鍵之一。
實驗設備:
冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)
實驗過程:
1、設置所需冷阱溫度-65℃,點擊“制冷”按鈕,提前預冷
2、在“參數(shù)設置”處,按要求依次設置速度,時間和溫度。選定需要的程序,點擊“溫度設置”開始提前加熱
3、待主機預熱溫度和冷阱預冷溫度達到所設置的參數(shù),即可將配置好的10ml的樣品放置濃縮儀進行配比,注意管口為開口狀態(tài),點擊“START”開始運行
4、設備運行過程中,可用頻閃儀觀察溶液濃縮情況,實時控制實驗進度
5、設備運行結束時,轉子停止運行后,蜂鳴器發(fā)出提示音,此時便可取出離心管獲取所需濃縮樣品
6、關閉冷阱,開始除霜回收冷阱中的溶劑。
實驗結果:
樣品研磨前后效果圖
需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度。蛋白純化需要獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。冷凍真空離心濃縮儀采用離心力、真空和加熱相結合的方法使樣品中的溶劑快速蒸發(fā),從而達到濃縮樣品的目的。低溫濃縮,使樣品更安全。廣泛應用于蛋白和分子結構實驗室。